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苏木素成分分析

发布时间:2016-01-11 12:04:26 来源:医科大 浏览:82次

苏木素成分分析

   苏木素是从洋苏木中提取的一种染色剂,它在被氧化后生成苏木精,同媒染剂(常用的是三价的铁或铝的盐)一起使用,能够使细胞核染色。苏木素是一种碱性染料。
   苏木素和伊红在组织学上被经常使用,与碘液不同,这是一种永久染色剂。其他常用的含有苏木素的染色剂有磷钨酸苏木素染色剂,也就是磷钨酸与苏木素的混合物。苏木素染色剂经常为组织的研究使用。 明矾和三价铁盐常常被用作媒染剂,展示核和细胞质结构。这些媒染剂的原理都是形成媒染剂-染料-组织复合体,从而显示颜色。使用的盐不同颜色也不同: 当用铁盐呈现深蓝色颜色沉淀,用铝盐通常显示蓝白色。下面分别介绍铝苏木素溶液和铁苏木素溶液。
   在20世纪70年代,由于巴西热带雨林被大量砍伐,洋苏木大量减少,苏木素的产量随即大量减少。苏木素的价格上升惊人,因而大大提高了组织病理学诊断的成本,引起了寻找苏木素替代品的高潮。不过,在各种苏木素的替代品的地位真正确立之前,苏木素又重返市场,又在组织病理学诊断中发挥其重要作用。到2013年为止,几种推荐使用的替代染剂有铬天青、焙花青、茜素紫(又名焦没食子酚酞、棓因)。这些染料都用三价铁离子作为媒染剂。焙花青还可以用铬矾作媒染剂。
  常用的两种铝苏木素溶液有Ehrlich氏溶液和Harris氏溶液。铝苏木素溶液能够把细胞核染成半透明的浅蓝色,在酸性环境下会迅速变成红色。作为媒染剂使用的钾铝硫酸盐在碱性溶液通常结合与氢氧根形成不能溶解的氢氧化铝。 在过量的酸中,氢氧化铝由于缺乏OH-离子而溶解,因此,铝苏木素溶液的酸性溶液变成红色。 在铝苏木素溶液染色时,被染色的部分通常转移到一种碱性溶液中,中和酸并释放氢氧根,形成一个不溶的蓝色铝苏木精复合物。
由于自来水碱性不十分强,通常用每升含有33.5 g NaHCO4和20克的MgSO4,并加入百里香酚兰的溶液代替。使用冷水会减慢染色过程。 实际上,使用在10°C之下的冷水甚至可能导致组织呈现红色。
  首先,在100 ml无水乙醇中溶解1 g 苏木素,微热。 然后,在100 ml蒸馏水中溶解60 g明矾加入100 ml甘油微热。 第三步,混合二种溶液并且增加10 ml冰醋酸。 然后转移到用棉花轻轻塞住口的烧瓶中,暴露在空气和阳光中几个星期,每天震荡溶液。在这个过程中,苏木素被部分氧化。 较后,把溶液转移到一个封口很严的试剂瓶中在温暖处存放。
染色时,有时需要加入0.3 g碘酸钠。 因为苏木素溶液被氧化,溶液的颜色从紫色将变成深红,而醋酸刺激性气味将变成宜人的芳香。 甘油作为稳定剂并且减速溶液的蒸发。 然而,甘油可以减速染料的成熟,所以可以在较初的制备以后的4到6个星期后加入。
Ehrlich的苏木素溶液染色时,黏多糖物质例如软骨素也被染成蓝色。 染色时间通常是15到40分钟。
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