邮箱:mail@domail.com | 手机: 400-805-0463

双荧光素酶实验

发布时间:2020-08-25 14:43:54 来源:医科大 浏览:662次

双荧光素酶实验

实验原理

        荧光素酶报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测荧光素酶活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪(化学发光仪)测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。

        双荧光素酶体系,即有两种荧光素酶,比较常见的组合是萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶,萤火虫荧光素酶作用于甲虫荧光素,而海肾荧光素酶在氧的存在下作用于海肾荧光素。以其中一个作为内参对照,即表达量基本恒定,用于减少试验中不同处理间所固有的变化,包括培养细胞的数目及活力的差异,细胞转染及裂解的效率,而另外一个荧光素酶则作为报告基因,用于指示不同处理条件下基因的表达情况。

实验应用:

潜在启动子/启动子核心区域检测;

潜在增强子/抑制子等调控子核心元件检测;

启动子区可能的转录因子结合位点检测;

启动子/增强子与转录因子的相互作用;

病毒/细胞相互作用;

药物等化学诱导因素对启动子活性的调节(抑制或增强);

射线等物理诱导因素对启动子活性的调节(抑制或增强);

microRNA靶基因验证。

以双荧光素酶实验进行microRNA靶基因验证为例,介绍相关的实验流程。

实验流程

实验流程

相关文章
医科毒理安全评价中心
医科毒理安全评价中心,与2014年成立,提供从认证到检测、分析与研发等多样性的服务,经过5年的科学研发,已发展成为综合性检测公司,检测项目包含生物学相容性试验,生物兼容性检测,毒理实验,驱蚊药液检测,抗霉检测实验,病毒灭活检测,涉及食品、医药、环境、新能源、电子电气、工业品、消费品及建材等不同的领域,致力于为客户提供更好的检测服务和更精准的检测依据。
在线留言
解决您的需求,就是我们的使命
友情链接: 飞凡检测

Copyright (c) 2018 - 飞凡检测 苏ICP备19002783号 网站地图